En 1853, Santa Ana regresó a la Presidencia
de la República, mediante una asonada. En marzo de 1854 don
Juan Alvarez proclamó el Plan de Ayutla que proponía
derrocar a Santa Ana y restablecer el régimen federal; al
año siguiente el abogado tlaxcalteca Guillermo Valle y sus
partidarios, se adhirieron al Plan de Ayutla y al triunfo de éste,
fue reconocido como Jefe Político de Tlaxcala, integrando
un Consejo de Gobierno y expidiendo un estatuto orgánico
con carácter provisional, a través del cual propuso
organizar políticamente el territorio tlaxcalteca. Con el
triunfo del Plan de Ayutla se convocó a un Congreso Constituyente
al cual Tlaxcala envió dos representantes, quienes llevaron
al seno del Legislativo la vieja demanda de que se le considerara
como estado libre y soberano dentro de la Unión, y no sólo
como un territorio.
El diputado Mariano Sánchez hizo una amplia defensa histórica
de la lucha tlaxcalteca por obtener su autonomía, así
como una exposición en la que demostraba la solvencia económica
y social de la entidad. En sesión solemne del 9 de diciembre
de 1856, los legisladores aprobaron que Tlaxcala dejara la condición
de territorio y asumiera la de estado libre y soberano. Por fin,
después de muchos avatares en su lucha por la autonomía,
la tenacidad y la razón histórica se impusieron. Al
año siguiente, Guillermo Valle fue electo gobernador del
estado por el Congreso constituyente de Tlaxcala.
Las inconsistencias políticas del general Ignacio Comonfort,
por ejemplo desautorizar la Constitución de 1857 o disolver
el Congreso federal y encarcelar a distinguidos liberales, dieron
pie para que los reaccionarios lo desconocieran como Presidente
de la República mediante el Plan de Tacubaya que firmaba
el general Félix Zuloaga, provocando un periodo de inestabilidad
que se conoce como la Guerra de Tres años. Guillermo Valle
se pronunció a favor de la rebelión y disolvió
el Congreso. Su Secretario General de Gobierno, Miguel Lira y Ortega,
con una fracción de la legislatura disuelta, se levantó
en armas a favor del régimen constitucional. Guillermo Valle
renunció a la gubernatura quedando como sustituto Manuel
Saldaña. Los conservadores designaron un Jefe Político
y declararon a Huamantla capital de Tlaxcala.
Las "blusas rojas" del anticlerical Antonio Carvajal, empezaron
a ser conocidas en los llanos de Apan, así como los guerrilleros
de Doroteo León, quienes combatieron a los conservadores
y contribuyeron al triunfo de los liberales, que permitió
la entrada del presidente Benito Juárez a la ciudad de México
el 10 de enero de 1861. En Tlaxcala, en marzo de ese año,
el Congreso llamó a ocupar la gubernatura a Manuel Saldaña.
La declaración de la suspensión de pagos de la deuda
nacional por el gobierno de Benito Juárez en 1862, fue usada
como pretexto por Napoleón III para provocar la guerra de
intervención contra México. Durante esta guerra se
distinguieron desde las primeras acciones el general Antonio Carvajal
y sus tropas tlaxcaltecas, quienes derrotaron al general imperialista
Leonardo Márquez en las inmediaciones de Atlixco, Puebla,
impidiéndole reforzar a las tropas del general francés
Carlos Fernando de la Trille, conde de Lorencez, que se aprestaban
a tomar la ciudad de Puebla, donde el general Ignacio Zaragoza les
infringiría una cabal derrota, el 5 de mayo de 1862.
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