La población tlaxcalteca comenzó a reducirse tras los enfrentamientos con los españoles y después con su participación en la toma de Tenochtitlán y en las expediciones, descubrimientos y conquistas organizadas por los capitanes españoles, de las cuales muchos ya no regresaron. Otro factor que influyó en el abatimiento de la población fue la colonización de la Gran Chichimeca en 1591, lo que implicó la salida de cuatrocientas familias a colonizar, pacificar y culturizar algunas zonas de los actuales territorios de San Luis Potosí, Jalisco, Zacatecas, Nuevo León, Coahuila, Texas, etc.

Por disposición del virrey Luis de Velasco II cada señorío aportaría 100 familias. Al final de cuentas fueron 106 de Ocotelulco, 103 de Tizatlán, 92 de Quiahuiztlán y 99 de Tepetícpac. Los de Ocotelulco partieron de su señorío el 6 de junio del mismo año; los de Tizatlán el día siguiente. Los de Quiahuiztlán y Tepetícpac, por no completarse, partieron finalmente el día 9.